Sie verwenden Trusted_Connection=True und damit der Benutzer ApplicationPoolIdentity oder IIS APPPOOL\mysite wird an den SQL-Server geliefert.
Möglichkeit 1. Erteilen Sie Berechtigungen für IIS APPPOOL\mysite im SQL-Server.
Möglichkeit 2. Verwenden Sie User Id=User_Id;Password=****** statt Trusted_Connection=True